Polysciences Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品，单/多聚体等产品的研发供应，所提供的产品服务于组织学（显微技术）、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。Polysciences公司成立之初的主要产品为电镜样品制备的相关产品，目前该产品线延伸为多种组织学研究产品，包括多种方式与用途的样品包埋、优秀的染料及诊断试剂盒。同时， 查看详情

FluorescenceReferenceStandardsarelabeledwithspecificFluorochromessothattheygiverisetothesamefluorescencespectraascellslabeledwiththesamefluorochromes.FluorescenceintensityissimilartoBIOLOGicalsamples.

Atestrequiresonedrop(50 l)ofparticlesUSPension,whichisequivalentto~100,000particles.BangsFlowCytometryStandardsare7-9 mindiameter(unlessotherwisenoted)toapproximatethesizeofhumanlymphocytes.

Availableinthreetestsizevolumes:

A-20tests(1ml)

B-100tests(5ml)

C-280tests(2x7ml)

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ThepurityofthetransgeneDNAusedformicroinjectioniscriticalforthesuccessfulproductionoftransgenicfoundermice.DNAimpuritiesintheformofbacterialendotoxinsororganiccontaminantscandecreasetheintegrationefficiencyoftransgeneDNAortheviABIlityofmicroinjectedembryos.AtransgeneconstructpreparedfromgenomicDNAispreferentialtoonepreparedfromaCDNAclone.Whilethere 查看更多

Doubledyefilling(usingDiOanddi-4ANEPPS)(KristaWilliams)DyeFillingLabel15mlcentrifuge(c/f)tubeswithstrainname.Squirt~1-2mlM9ontoplatewithaPasteurpipet.RinseplatewithM9usingapasteurpipetandtransfersolutiontoc/ftube.Spinpulseonhighinaclinicalc/fandcarefullyremovesupernatant(s/n).Wormpelletwillbeveryloose.WashoncewithM9(optional).Add2mlM9.AddDiO(2mg/ml 查看更多

LacZ-cellStainingMaterials:1)0.5%glutaraldehydeinPBS2)20mMK4Fe(CN)6o3H2O0.44ginto50mlPBS3)20mMK3Fe(CN)60.33ginto50mlPBS4)X-gal2%inDMF5)PBScontaining1mMMgCl26)StainingsolutionIngredients:Per1ml:20mMK4Fe(CN)6o3H2O/PBS250 l20mMK3Fe(CN)6/PBS250 l1MMgCl21 l2%X-gal50 lPBSto1mlProcedures:1)Washthecellstwicewith2mlPBS(I\"massumingyou 查看更多

YeastIFwithMethanol/AcetoneDehydrationDavidAmbergNotethisprotocolisamodifiedversionoftheprotocolfromMarkRoseintheCSHYeastGeneticsCourseManual.ThisistheprotocoltousewiththeBotsteinanti-actinrabbitantibodies.Growcellsattheappropriatetemperatureto5x10E6in5mlsYPD.Add0.5mls37%formaldehyde(bestgrade)andincubateontherolleratsametemp.for10min.Spindowncells 查看更多

DAPIStainingTovisualizeDNA,incubatefixedsampleswith100ng/ml4\",6\"-diamidino-2-phenylindolehydrochloride(DAPI)inPBSfor30min.Rinse3xwithPBTw.MaterialsPBS:Sambrooketal.(MolecularCloning).PBTw:PBScontaining0.1%Tween20.DAPI:100ug/mlstocksolutionindH2O.Storeat-20. 查看更多

EMFixationofEmbryosAdaptedfollowingadvicefromAndyFireandJimPriess1.MountembryosonslidesasifforDIC,exceptagarhasfixative.AgaroseFixative3ml2%Agarose:1.5%LGTAgarose+.05%HGTAgarose5ul1MMgCl2400ul0.2MNaCacodylate(pH7.4)400ulsucrose(68.46g/100ml)500ul25%GlutaraldehydeMakeupabovemixtureimmediatelybeforemountingembryos.Thepadshouldbethick,sousetriplethick 查看更多

蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑； Ebiomall是跨境直采平台，我们直接从厂家采购，自己的团队负责国际物流和清关，中间没有第三方，蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品，假一罚十。 未确认状态的订单可以修改，打开\"订单详情”页面，点击右上角的\"修改订单”即可，若已审核确定，则订单无法修改。 现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。 蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能，点击\"联系客服”、\"咨询”或\"在线咨询”按钮，均可咨询蚂蚁淘在线客服人员， 或拨打4000-520-616，除此之外客户可在 联系我们页面找到更多的联系方式。 同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出，可能不会同时送达，建议查看订单详情是否是部分发货状态；如未收到，可联系在线客服或者致电4000-520-616。 一般情况下，退货处理周期为客户收到产品一个月内（以快递公司显示签收时间为准），包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在收到货24小时内申请退换货；特殊商品以合同条款为准。 染料的荧光跟重金属之间没有必然联系。一般含有重金属的染料都是金属络合染料，现在几乎绝迹了。现在大多数染料都是活性、直接、还原和分散这几种类型。都是不含重金属的。而带有荧光的染料是非常少的，只有那么几种，跟重金属没有丝毫关系。ng1iy2 1516629085 示踪染料有很多种，跟据你的目的和实验方法来选取，比如calcein，dri，cfda，还有bcef等。这些染料都非常成熟，光毒和淬灭都很低，当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。比如calcein，常用的示踪，绿光（虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩），但要考虑你的实验过程中结合细胞结构，是否会伴... 显示更多 示踪染料有很多种，跟据你的目的和实验方法来选取，比如calcein，dri，cfda，还有bcef等。这些染料都非常成熟，光毒和淬灭都很低，当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。比如calcein，常用的示踪，绿光（虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩），但要考虑你的实验过程中结合细胞结构，是否会伴随calcein的泄漏，就是荧光降低。dri，还可以看膜啊cfda也不错bcef虽是ph指示，但你试验时不仅可观察细胞，还可看细胞ph变化，也行。当然你或许还要结合其他方法，如细胞免疫化学等手段去双染或多染，都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料，有点浪费，不如多染，数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。 收起 最常用的就是洗衣粉中的荧光增白剂，也就是白色荧光染料，几乎所有配方的洗衣粉中都有。然后是碱性荧光染料，造纸厂用来增加纸的亮度。直接和分散的荧光黄，印染厂用来增加棉质和化纤面料的艳度淘宝九色鹿丝绸 1516427967 目前荧光免疫产品中多数用的是荧光素还是荧光微球还是荧光染料抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法⑴荧光物质1）荧光色素许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素... 显示更多 目前荧光免疫产品中多数用的是荧光素还是荧光微球还是荧光染料抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法⑴荧光物质1）荧光色素许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：⑴异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490--495nm，最大发射光波长520--530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感，②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。⑵四乙基罗丹明（rhodamine，RIB200）为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。⑶四甲基异硫氰酸罗丹明（tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC）结构式如下：最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。⑵其他荧光物质1）酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。2）镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3 ）、铽（Tb3 ）、铈（Ce3 ）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3 应用最广。Eu3螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。展开 收起 溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加， 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。... 显示更多 溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加， 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别，线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来，氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时，为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁，但其中最好的方法，也应是聚乙二醇分级沉淀法。从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多，其分离的依据可利用分子大小不同，碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好，既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA，由于DNA片段较大易于损伤断裂，因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA，且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒，用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。质粒DNA纯化的试验步骤：测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。室温下用Sorvall SS34头（或与其相当的转头）以8000rpm离心5min， 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h（VTi65 转头）、 以45 000rpm离心48h（Ti50转头）、以60 000rpm离心24h（Ti65转头）或者以60 000rpm离心24h（Ti70.1转头）。普通光照下，在梯中心可见两条DNA区带， 上部区带材料通常较少，由线状的细菌（染色体）DNA和带切口的环状质粒DNA组成：下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物，位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl－溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在，将扩展为一条宽带，并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷，可收集整个DNA区高产水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷，可收集整个DNA区带，用CsCl溶液（ρ=1.58g/ml）将体积调到15ml，在两个离心管中再度离心，使DNA达到平衡。收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入，为尽量减少污染的机会，首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带（杂色体DNA）：用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂，然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头（其斜面向上）插入管中，以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内，用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头（18号），将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开 收起 看了这么多，此话题的前面的内容挺不错，后面的大家的问题我大概总结一下，1.关于绝对定量，相对定量的问题绝对定量：从字面理解，目的是要知道你的基因的具体拷贝数。相对定量：要知道你的基因的相对表达量。见NucleicAcidsResearch,2001,Vol.29,No.900... 显示更多 看了这么多，此话题的前面的内容挺不错，后面的大家的问题我大概总结一下，1.关于绝对定量，相对定量的问题绝对定量：从字面理解，目的是要知道你的基因的具体拷贝数。相对定量：要知道你的基因的相对表达量。见NucleicAcidsResearch,2001,Vol.29,No.900,文章题目：anewmathematicalmodelforrelativequantificationinreal-timert-pcr.TAKARA,有篇\"COMPETITIVEPCRGUIDE”讲内参照的，可以看看。2.试剂溶解的问题，一般用去离子灭菌水即可，宝贵的样品可以按照各位主任说的没错。如果是新手本版内容从头仔细看看。3.反应体系：1）MG2+浓度肯定和普通的不一样，3.5-8不等，有文献有过详细的分析，文章我没找到，去网上找一下，用英文关键词。2）引物的浓度和探针浓度比例非常重要，仔细摸索一下，肯定可以解决，2：1～9：1不等，3）据我的实验看，体系的体积好像对实验也有影响，具体不明，4）实验具体的浓度量没个定量的，每个基因的效果也不一样，我一年前的探针，（探针没有稀释）怎么都做不好，现在拿出来做，结果很好，什么MG2+,引物，探针啊，我没有计算他们的量，随手加的。4．反应条件：正如痛并快乐着丁香园主任所说，两步法即可，如果你三步法结果可以也无妨。5．Taqman，sb区别，看一下他们的工作原理，网上很多文章，sb可以除了定量，还可以做溶解度曲线，可以看出是否有非特异扩增。www.wzw.tum.de/gene-quantification/此网站有很多关于定量PCR的文献，认真看，很好的。 收起 小妹还有几个问题想请教：1、同一台荧光定量pcr仪是否即可以作探针也可以作染料的。2、探针和染料的试剂盒是否一样的。3、我要用的是探针，可不可以推荐一些价格便宜一点的试剂盒。4、我要扩增的片断是160bp，这种长度能否通过合成制定标准品。5、请问哪里可以找到如何使用纯化样品的PCR产物作标准品的方法的相关资料。flower_de_luce 1088047006 小妹还有一个问题需要各位大虾帮忙，如何以样品制作标准曲线进行相对定量，哪里有这方面的文献，谢谢。flower_de_luce 1087329171 荧光染料是一种能吸收部分子外光，将紫外光转化为可见光，从而增加亮度的着色剂，从而使颜色极为鲜明。 荧光燃料使用的问题有两个：一个就是迁移性，使用时要严格控制用量，以避免产生迁移现象；二是荧光染料使用有一个极限值，如果超量使用，导致荧光线被吸收，使吸收和发光成叠所致。色粉工厂 1516724570